一九七六年开始从事表演艺术。一九七九年毕业于江苏省艺术学院表演系。一九九七年六月曾参加《ASIASOCIETY》在美国好莱坞举行的电影文化研讨会，并荣获美国加州政府州务卿江月桂女士颁发的奖状。1988年离开影视圈，就在珠海投资200万创建了一个电脑研发集团，当了几年的总经理，不但对商海，包括对计算机都有了太多的体验。三四十岁以上的观众都还记得，马晓伟原是上海电影制片厂著名演员，在上世纪七八十年代，连续拍了近20部电影，有影响的有《海之恋》、《喜盈门》、《雁归来》、《开枪，为他送行》、《雷雨》、《快乐单身汉》等，很受当时观众的欢迎，他也因为扮演农民、工人、知识分子等角色被坊间称为“北有唐国强，南有马晓伟”，“白马王子”的。

1996年开始从事表演艺术。1979年毕业于江苏省艺术学院表演系。1996年6月曾参加《ASIASOCIETY》在美国好莱坞举行的电影文化研讨会，并荣获美国加州政府州务卿江月桂女士颁发的奖状。1988年离开影视圈，就在珠海投资200万创建了一个电脑研发集团，当了几年的总经理，不但对商海，包括对计算机都有了太多的体验。三四十岁以上的观众都还记得，马晓伟原是上海电影制片厂著名演员，在上世纪七八十年代，连续拍了近20部电影，有影响的有《海之恋》、《喜盈门》、《雁归来》、《开枪，为他送行》、《雷雨》、《快乐单身汉》等，很受当时观众的欢迎，他也因为扮演农民、工人、知识分子等角色被坊间称为“北有唐国强，南有马晓伟”，“白马王子”的。在《国母宋庆龄》中，毛泽东、蒋介石这两个从外形到内涵都相差甚远的角色会同时落在自己身上呢？马晓伟先有些无奈地表示：这可不是我硬要贪功，都是导演的安排。“其实最初我只是去扮演剧中的蒋介石，而刚好该剧有6集毛泽东的戏，在没有找到其他人选的情况下，导演就安排我上了。”马晓伟坦言，他这样做并不是想出什么风头，自己也担心观众有看法，不过后来经过化妆师的雕琢，“我发现同一剧中两个人物在外形上已经非常的鲜活，最终在塑造个性上就得靠演员的演技了，对此我倒有十足的信心。”应该说从唐国强饰演毛泽东到马晓伟饰演蒋介石，已经宣告中国的影视艺术走出了特型演员独霸特型角色的阶段。马晓伟认为，这其实是影视艺术发展的必然，“解决特型角色是非常容易的事情了，而我们应该明白的是特型并不是简单的模仿秀，他需要演员用各自的积淀去拼演技、拼神似。”马晓伟说，“在《延安颂》中饰演蒋介石一角时，我并不仅仅从人民公敌的角度去诠释这个人物，而是去挖掘了许多他内在的东西，这就避免了把人物演得过于脸谱化。”因此，“不管毛泽东和蒋介石在近代史上是如何举足轻重的人物，可在剧本中，我就是当他们是两个丰满的角色。”一人同时拿下两个特型角色，说实话对于一个演员来说胆子够大，如此这般是否有抢特型演员饭碗之嫌呢？听到记者的疑问，马晓伟轻松地大笑起来：“不存在这个问题吧？拍影视剧时，对演员的要求其实很大程度要看导演的选择，而且如今的特型演员并不简单是外形优势，他们很多具备相当的实力。”不管是哪种类型的演员，只要仔细揣摩角色，抓住人物骨子里的东西，用心去演绎，同样会受到观众的认可。“我不是特型演员，但我饰演的蒋介石也得到了认可。

2019年主演都市法制剧《因法之名》中扮演许子蒙父亲许志逸。

马晓伟从艺以来，塑造过工农商学兵各种角色，曾被誉为电影时代符号人物，家喻户晓，是知名度较高的演员。